叔马里奥被杀,艾吉奥中枪逃走,金苹果也再次落入了圣殿骑士手中。 艾吉奥来到罗马,不断地削弱圣殿骑士的势力,夺回金苹果的艾吉奥在苹果的指引下,把它藏在了罗马斗兽场下的神殿,等待着五百年后某个人的出现。 艾吉奥稳固了刺客组织在意大利的势力,将整个刺客组织发展壮大。在某次叔叔马里奥的文档时,艾吉奥发现了一封他父亲的来信,提及了一个隐藏在著名刺客阿泰尔出生地马斯亚夫的秘密图书馆。